![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Разработана методика получения рекомбинантного тропонина С. Для экспрессии использовали синтетически полученный ген (TNNC1), вставленный в вектор pET23a(+). Для трансформации использовались компетентные клетки E.coli штамма Rosetta. Подобраны условия для экспрессии, последующего лизинга клеток и ренатурации белка. Разработана методика выделения рекомбинантного тропонина С, сочетающая аффинную хроматографию с использованием моноклональных антител к тропонину С и ионобменную хроматографию на HiTrap DEAE FF. Полученный препарат рекомбинантного тропонина С был охарактеризован при помощи биохимических и иммунохимических методов. По своим основным свойствам полученный белок не отличался от нативного, выделенного из ткани тропонина С. Разработана методика in-vitro получения бинарного комплексов тропонина I c тропонином С и тройного комплекса тропонинов I, С и Т. Все комплексы были протестированы с помощью моноклональных антител. По своим иммунохимическим свойствам полученных комплексы рекомбинантных белков были близки к соответствующим комплексам, как нативным, так и полученным путем комбинации тропонинов I, Т и С, выделенных из тканей.
госбюджет, раздел 0110 (для тем по госзаданию) |
# | Сроки | Название |
14 | 1 января 2014 г.-31 декабря 2014 г. | Исследование структуры и функций белков иммунохимическими методами, биотехнологические аспекты |
Результаты этапа: Разработана методика получения рекомбинантного тропонина С. Для экспрессии использовали синтетически полученный ген (TNNC1), вставленный в вектор pET23a(+). Для трансформации использовались компетентные клетки E.coli штамма Rosetta. Подобраны условия для экспрессии, последующего лизинга клеток и ренатурации белка. Разработана методика выделения рекомбинантного тропонина С, сочетающая аффинную хроматографию с использованием моноклональных антител к тропонину С и ионобменную хроматографию на HiTrap DEAE FF. Полученный препарат рекомбинантного тропонина С был охарактеризован при помощи биохимических и иммунохимических методов. По своим основным свойствам полученный белок не отличался от нативного, выделенного из ткани тропонина С. Разработана методика in-vitro получения бинарного комплексов тропонина I c тропонином С и тройного комплекса тропонинов I, С и Т. Все комплексы были протестированы с помощью моноклональных антител. По своим иммунохимическим свойствам полученных комплексы рекомбинантных белков были близки к соответствующим комплексам, как нативным, так и полученным путем комбинации тропонинов I, Т и С, выделенных из тканей. | ||
15 | 1 января 2015 г.-31 декабря 2015 г. | Исследование структуры и функций белков иммунохимическими методами, биотехнологические аспекты |
Результаты этапа: |
Для прикрепления результата сначала выберете тип результата (статьи, книги, ...). После чего введите несколько символов в поле поиска прикрепляемого результата, затем выберете один из предложенных и нажмите кнопку "Добавить".