ИСТИНА

В результате выполнения НИР были разработаны два образца инновационных кандидатных вакцины для сельскохозяйственных животных и птиц на основе модифицированного вируса растений – вируса табачной мозаики (ВТМ). Из очищенных препаратов ВТМ были получены и охарактеризованы структурно модифицированные вирусные (сферические) частицы (СЧ), используемые в качестве платформ для презентации атигенов. Накоплен и очищен вирус Менго, используемый в качестве антигена для получения in vitro кандидатной вакцины, представляющей собой двухкомпонентый комплекс «СЧ - вирус Менго». Кандидатная вакцина, состоящая из сферических частиц ВТМ (СЧ) и вируса Менго охарактеризована физико-химическими методами. С помощью метода электронной микроскопии впервые было показано, что антигены вируса Менго располагаются на поверхности СЧ. Размеры кандидатной вакцины против вирусов семейства Picornaviridae составили в диаметре 336±14 нм. Методом иммунофлуоресцентной микроскопии показано, что вирус Менго в составе кандидатной вакцины обладает антигенной активностью. При иммунизации лабораторных животных кандидатной вакциной (комплексом СЧ-вирус Менго) получен титр антисывороток к вирусу Менго, равный 1/500 000. В ходе выполнения проекта впервые полностью охарактеризованы комплексы, состоящие из структурно модифицированного вируса растений и икосаэдрических частиц патогена сельскохозяйственных животных. Таким образом, разработана кандидатная вакцина против энцефалита и миокардита животных, вызываемых вирусами семейства Picornaviridae (род Cardiоvirus) путем внеклеточной блочной сборки иммуногенных комплексов на основе сферических частиц-платформ, продуктов термической перестройки ВТМ и вируса-патогена. Подход, предложенный при создании кандидатной вакцины против энцефаломиокрадита сельскохозяйственных животных, является полностью оригинальным и не имеет аналогов Впервые описано успешное получение новой формы палочковидных химерных частиц, в которых плотность расположения и пространственная близость консервативных антигенов вируса гриппа А на поверхности жестких спиральных наноструктур выше, чем на поверхности икосаэдрических (HBcAg) или спиральных нитевидных (PapMV) частиц. На основе полноразмерной геномной кДНК ВТМ был создан вирусный вектор, содержащий последовательность, кодирующую М2е-эпитоп вируса гриппа птиц (штамм H5N1), была выполнена экспрессия М2е- эпитопа вируса гриппа птиц в растениях Nicotiana benthamiana, накоплены и очищены химерные частицы ВТМ - М2е, кандидатные вакцины против вируса гриппа, состоящие из двух структурных белков с молекулярными массами около 20 и 24 кДа. Изучены функциональные свойства кандидатной вакцины, в том числе: стабильность в физиологических условиях, антигенная специфичность (in vitro), иммуногенность (in vivo) (иммуногенные свойства химерных частиц ВТМ-М2 выделенных из системных листьев растения Nicotiana benthamiana после агробактериальной инфильтрации), а также физико-химические свойства, показатели качества и состава, экспериментальных образцов кандидатной вакцины против вируса гриппа. Впервые показана высокая иммуногенность химерных частиц ВТМ, несущих на своей поверхности антигенные детерминанты вируса гриппа А птиц Таким образом разработана кандидатная вакцины против вируса гриппа птиц (H5N1) на основе рекомбинантного ВТМ, полученного из растений при репликации геномной кДНК, включающего последовательность антигенной детерминанты вируса гриппа - внеклеточного домена матриксного белка М2.

1.1 Создание научно-технического задела и разработка инновационных продуктов для агропромышленного комплекса. Повышение устойчивости животных к возбудителям болезней с помощью создания инновационных вакцин, полученных на основе модифицированных вирусов растений. 1.2. Разработка инновационных кандидатных вакцин для сельскохозяйственных животных на основе модифицированного вируса растений - вируса табачной мозаики (ВТМ). Создание вакцины против энцефоламиокардита свиней и крупного рогатого скота путем внеклеточной блочной сборки иммуногенных комплексов на основе сферических частиц-платформ, продуктов термической перестройки ВТМ и вируса-патогена; и создание вакцины против вируса гриппа птиц (H5N1) на основе рекомбинантного ВТМ, полученно-го из растений при репликации геномной кДНК, включающего последовательность антигенной детерминанты вируса гриппа - внеклеточного домена матриксного белка М2. В результате выполнения НИР были разработаны два образца инновационных кандидатных вакцины для сельскохозяйственных животных и птиц на основе модифицированного вируса растений – вируса табачной мозаики (ВТМ).