ИСТИНА

Гипотоническая обработка живых клеток приводит к разборке ядрышка и перемещению ядрышковых белков в нуклеоплазму. После возврата в изотонические условия в нуклеоплазме формируются многочисленные тельца – интерфазные проядрышки (Zatsepina et al., 1997). В проекте исследована роль интерфазных проядрышек в процессах восстановления структуры ядрышка после возврата из гипотонического шока. Показано, что интерфазные проядрышки обладают ограниченной подвижностью внутри ядра. Наблюдаются только отдельные события слияния проядрышек друг с другом и с ядрышками, направленного движения проядрышек в сторону ядрышек не наблюдается. По-видимому, ограниченная подвижность проядрышек определяется плотной сетью конденсированного хроматина, реконструкция которой была проведена на основании серийных ультратонких срезов. Методом восстановления флуоресценции после фотообесцвечивания (FRAP) продемонстрировано, что мажорный ядрышковый белок В23 не связан с проядрышками стабильно, а обменивается между проядрышками и окружающей нуклеоплазмой. По мере восстановления структуры ядрышка В23 постепенно уходит из проядрышек и накапливается в ядрышках, что приводит к исчезновенияю проядрышек. Таким образом, проядрышки являются временными структурами, в которых накапливаются ядрышковые белки.

1) Изучены протяженные во времени события, сопровождающие восстановление структуры ядрышка, с использованием прижизненных наблюдений клеток (4D-микроскопия). 2.) Количественно проанализирована динамика ухода белка В23 из индивидуальных интерфазных проядрышек с течением времени. 3) С использованием метода FRAP исследовать динамику обмена белка В23 между проядрышками и нуклеоплазмой.