| Результаты этапа: Изучена динамика изменений фибриллярных (микротрубочки, актиновые филаменты) и адгезивных (фокальные контакты и VE-кадгериновые межклеточные контакты) структур цитоскелета эндотелиоцитов в норме и при воздействии веществ, нарушающих барьерную функцию эндотелия. Исследован молекулярный каскад, приводящий к развитию барьерной дисфункции эндотелия человека, возникающей в клинической практике при целом ряде патологических состояний (отек легкого, острая рана легкого и т.д.), в том числе, при осложнениях, связанных с приемом противораковых препаратов. Предложена функциональная экспериментальная модель для исследования барьерных свойств человеческого эндотелия, в которой живые клетки, выделенные из организма человека, экспрессируют необходимые для целей исследования флуоресцентно меченные белки различных компонентов цитоскелета эндотелиоцитов. Методами иммунофлуоресцентного анализа и комбинированной экспрессии показано, что отсутствие плюс-концов микротрубочек в зоне межклеточных контактов, возникающее в результате изменения их динамических свойств, напрямую связано с возникновением барьерной дисфункции, вызываемой воздействием тромбина (естественный гормон человека) и нокодазола (аналог противораковых митостатиков) и коррелирует с разрушением VE-кадгериновых контактов и с быстрым ростом фокальных контактов. Выдвинута гипотеза о том, что снижение количества плюс-концов динамичных микротрубочек является необходимым и достаточным условием для нарушения проницаемости эндотелия. |
