Рекобинантный лизостафин Staphylococcus simulans: получение, очистка и определение противостафилококковой активностистатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК
Статья опубликована в журнале из списка Web of Science и/или Scopus
Дата последнего поиска статьи во внешних источниках: 24 января 2020 г.
Аннотация:Лизостафин Staphylococcus simulans – эндопептидаза, лизирующая клеточные стенки стафилококков посредством расщепления пентаглициновых поперечных сшивок пептидогликана. Синтетический ген лизостафина S. simulans клонирован в клетках Escherichia coli, получены штаммы-продуценты рекомбинантного лизостафина. Уровень продукции биологически активного лизостафина составил 6 - 30% общего клеточного белка E. coli (в зависимости от штамма-продуцента E. coli M15 или BL21) при периодическом культивировании. Разработаны новые методы очистки лизостафина, не содержащего аффинных доменов, и тестирования его активности. На основании данных электрофореза в ПАГ, чистота очищенного рекомбинантного лизостафина составляет >97%. Полученный препарат лизирует тестированные штаммы-клинические изоляты S. aureus и S. haemolyticus. Активность in vitro и общие биохимические свойства очищенного рекомбинантного лизостафина, продуцируемого обоими штаммами E. coli, идентичны таковым рекомбинантного лизостафина, поставляемого фирмой Sigma-Aldrich (США) и используемого в качестве препарата сравнения в исследованиях других авторов. Благодаря простой схеме очистки, высокой степени чистоты и высокой противостафилококковой активности полученный рекомбинантный лизостафин представляет собой перспективный продукт для разработки ферментного препарата для применения в медицине и ветеринарии.