Аннотация:Присутствие спонтанно образованных микроядер (МЯ) является характерной чертой опухолевых клеток. При этом наличие МЯ само по себе может индуцировать опухолевую трансформацию клетки, в т.ч. путем запуска хромтрипсиса. Действие ряда химиотерапевтических препаратов основано на индукции образования микроядерных клеток, которые в дальнейшем гибнут путем апоптоза (р53+ опухоли). Однако в случае выживания опухолевой клетки с индуцированными микроядрами возможно дальнейшее озлокачествление процесса.
Целью исследования являлась оценка жизнеспособности культивируемых опухолевых клеток человека со спонтанными и индуцированными МЯ и морфофункциональная характеристика МЯ.
Спонтанные МЯ исследовались в клетках эпидермоидной карциномы (А431, р53-) и аденокарциномы молочной железы (MCF-7, р53+). Образование МЯ в клетках MCF-7 вызывали воздействием паклитакселом (ПТ) (125 нМ, 48 ч). Выживаемость клеток оценивали на протяжении 7 сут. после удаления агента. Использованы методы прижизненного наблюдения, цито- и иммунофлуоресцентной микроскопии (LamB1, γН2Ах, p53, Ki-67, EdU), МТТ-тест, ТЭМ. Морфометрический анализ произведён с помощью ПО «Vision Bio» («West Medica», Россия).
Доля клеток со спонтанными МЯ сходна в обеих культурах (13,9±0,5% (MCF-7) и 15,8±1,4% (А431)). Среди МЯ выделены 2 группы: крупные (S > 4 мкм2) и мелкие (S < 4 мкм2). Клетки с МЯ сохраняют жизнеспособность (23 из 25 MCF-7, 10 из 10 А431 в течении 24 ч), пролиферативную (Ki-67+: 89,8±1,2% (MCF-7); 96,0±0,7% (431)) и репликативную активность (EdU+: 15,9±1,2% (MCF-7), 35,6±1,1% (А431)). Репликация в основном ядре и МЯ в 90% случаев протекает асинхронно. Спонтанные МЯ характеризуются наличием дефектов ламины (15±1,7%), содержат поврежденную ДНК (γН2Ах+: 19,1±1,1%). В клетках MCF-7 в 48,7±1,2% клеток с МЯ не происходит активации р53. В целом, морфофункциональные дефекты более выражены в мелких МЯ и в МЯ клеток А431 (р53-).