Аннотация:Одной из актуальных проблем современности является растущий уровень резистентности к антибиотикам среди бактерий – патогенов человека и животных. В этой связи все большее внимание уделяется альтернативным терапевтическим агентам. В настоящей работе исследовано воздействие бактериофага vB_KpnP_FZ12 на биопленки Klebsiella pneumoniae.
Использовали штамм Klebsiella pneumoniae 315 и бактериофаг vB_KpnP_FZ12.
Для изучения формирования биопленок в жидких питательных средах популяциями Klebsiella pneumoniae 315 использовали 17…18-часовые культуры микроорганизмов в S-форме (третья генерация). Взвесь бактерий в концентрации 1∙105 КОЕ/мл в объеме 5 мл перемешивали на аппарате Vortex и вносили в чашки Петри с 20 мл BHI бульона. Стерильные предметные стекла помещали на дно чашки Петри, сверху располагали стерильные обезжиренные покровные стекла, инкубировали в термостате в течение 24…48 ч при температуре 37°С. Через 24 ч добавляли 0,1 мл бактериофага vB_KpnP_FZ12 концентрацией 1∙106 БОЕ/мл, инкубировали в термостате в течение 24 ч при температуре 37°С. Параллельно инкубировали контрольные стекла без добавления фага.
Для сохранения естественной архитектоники образцы прижизненно фиксировали парами 25%-го глутарового альдегида в течение 3…5 ч.
Было показано, что бактериофаг способен эффективно разрушать структуру биопленки, кластеров, при этом значительно сокращая количество бактерий.