Аннотация:Контролируемый доступ к ДНК в составе хроматина, необходимый для экспрессии генов, обеспечивается регуляторными факторами – такими, как белковый комплекс FACT. Как установлено ранее, дрожжевой FACT (yFACT) в присутствии белка Nhp6 осуществляет АТФ-независимое обратимое разворачивание нуклеосом, механизм которого требует детального изучения. В настоящей работе с целью изучения механизма разворачивания нуклеосом исследовано, достаточно ли одной молекулы Nhp6 для раскручивания нуклеосомной ДНК фактором yFACT или реорганизация структуры нуклеосомы требует совместного действия yFACT и нескольких молекул Nhp6. Исследования, проведенные методом электрофореза в нативных условиях, показали, что yFACT может связывать не менее трех молекул Nhp6. С помощью микроскопии одиночных частиц на основе Ферстеровского резонансного переноса энергии установлено, что при увеличении соотношения yFACT:Nhp6 с 1:10 до 1:1 при постоянной концентрации Nhp6 способность yFACT разворачивать нуклеосомы не повышается, а снижается. Следовательно, для разворачивания нуклеосом необходимо связывание более одной молекулы Nhp6 в комплексе нуклеосома:yFACT:Nhp6. Полученные данные уточняют существующие представления о реорганизации структуры нуклеосом фактором yFACT.КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВАхроматин, нуклеосома, FACT, Spt16, Pob3, Nhp6