|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Направленная инактивация генов dhfr, glul, bak1, bax методом мультиплексного геномного редактирования клеток CHOстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
- Авторы: Орлова Н.А., Даянова Л.К., Гаямова Е.А., Синегубова М.В., Ковнир С.В., Воробьев И.И.
- Журнал: Доклады Российской академии наук. Науки о жизни
- Том: 502
- Номер: 1
- Год издания: 2022
- Издательство: Российская академия наук
- Местоположение издательства: Москва
- Первая страница: 54
- Последняя страница: 59
- DOI: 10.31857/s2686738922010188
- Аннотация: Линия клеток яичника китайского хомячка CHO широко используется в биофармацевтическом производстве. Редактирование генома позволяет улучшить ростовые свойства клеток, их ауксотрофность, работу систем индукции апоптоза и аутофагии. Одновременное редактирование многих генов позволяет получить линию с требуемым генотипом быстрее, чем при последовательных геномных нокаутах, но с меньшей вероятностью. При одновременном редактировании генов dhfr, glul, bak1, bax в геноме клеток CHO S получено 24 клона с признаками ауксотрофности по тимидину и глутамину. Среди них обнаружено пять dhfr+/- клонов, все они содержали нокаут одного или двух аллелей glul. В одном клоне было инактивировано сдвигом рамки 7 целевых аллелей из 8 и частично инактивирован второй аллель dhfr инсерцией триплета GAA, что снизило активность фермента в 2.5 раза. Вероятность одновременного нокаута обоих аллелей dhfr была увеличена до 50% при редактировании генома парой гидовых РНК, направленных к одному экзону гена dhfr.
- Добавил в систему: Воробьев Иван Иванович