|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА МУТАНТНОЙ ФОРМЫ D-ГЛЮКОЗА/D-ГАЛАКТОЗА-СВЯЗЫВАЮЩЕГО БЕЛКА GGBP/H152C С ПРИСОЕДИНЕННЫМ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ КРАСИТЕЛЕМ BADANстатья
- Авторы: Фонин А.В., Степаненко Ольга В., Поварова О.И., Волова Е.А., Филиппова Е.М., Бубликов Г.С., Кузнецова И.М., Демченко А.П., Туроверов К.К.
- Журнал: Цитология [Пер.: Cell and Tissue Biol
- Том: 55
- Номер: 12
- Год издания: 2013
- Первая страница: 886
- Последняя страница: 892
- Аннотация: Исследовано влияние различных факторов на физико-химические свойства и комплексообразование с глюкозой мутантной формы D-глюкоза/D-галактоза-связывающего белка GGBP/H152C с присоединенным к цистеиновому остатку Сys 152 сольватохромным красителем BADAN. Этот белок может рассматриваться как чувствительный элемент глюкометра. Точечная аминокислотная замена His 152 на Cys и присоединение BADAN по этому положению более чем в 8 раз снижают сродство мутантной формы GGBP/H152C к глюкозе по сравнению с белком дикого типа, что позволяет использовать эту мутантную форму для определения содержания сахара в биологических жидкостях, извлекаемых с помощью трансдермальных технологий. Достаточно быстрое комплексообразование GGBP/H152C с глюкозой (даже в растворах с вязкостью 4 сПз время образования комплекса белок-Glc не превышает 3 с) обеспечивает возможность своевременно отслеживать изменения концентрации сахара. Изменение ионной силы и рН раствора в пределах физиологического диапазона значений этих величин не оказывает заметного влияния на флуоресцентные характеристики GGBP/H152C-BADAN. В области кислых значений рН часть молекул GGBP/H152C находится в развернутом состоянии. Показано, что мутантная форма GGBP/H152C обладает относительно невысокой устойчивостью к денатурирующему воздействию гуанидингидрохлорида. Этот результат позволяет сделать вывод о необходимости поиска более стабильных белков для создания чувствительного элемента биосенсорной системы на глюкозу.
- Добавил в систему: Степаненко Ольга Викторовна