Структурные исследования рекомбинантного ростового домена урокиназы

Белоглазова, И.Б.; Бибилашвили, P.Ш.; Гурский, Я.Г.; Бочаров, Э.В.; Минеев, К.С.; Парфенова, Е.В.; Ткачук, В.А.

Авторы: Белоглазова И.Б., Бибилашвили P.Ш., Гурский Я.Г., Бочаров Э.В., Минеев К.С., Парфенова Е.В., Ткачук В.А.
Журнал: Биохимия
Том: 78
Номер: 5
Год издания: 2013
Издательство: ФГБУ "Издательство "Наука"
Местоположение издательства: Москва
Первая страница: 675
Последняя страница: 691
Аннотация: Активатор плазминогена урокиназного типа (uPA) является сериновой протеазой, которая переводит про фермент плазминоген в протеолитически активную форму плазмин. Урокиназа синтезируется и секретиру ется в виде одноцепочечной молекулы, состоящей из Nконцевого домена (GFD), кринглдомена (KD) и C концевого протеолитического домена (PD). Структура ATF (фрагмент урокиназы, состоящий из GFD и KD) в свободном состоянии и в комплексе с рецептором урокиназы (uPAR, CD87), лишенным ГФИякоря, была изучена ранее методами ЯМР (Hansen et al., 1994) и рентгеноструктурного анализа (Barinka et al., 2006). Согласно полученным данным, в структуре GFD выделяют две области, состоящие из βслоев, ориентиро ванных перпендикулярно друг к другу. GFDобласть, отвечающая за связывание с uPAR, расположена в подвижной Ωпетле, состоящей из семи аминокислотных остатков и соединяющей два тяжа антипарал лельного βслоя. Методом точечного мутагенеза было показано, что укорачивание Ωпетли на одну амино кислоту приводит к неспособности GFD взаимодействовать с uPAR (Magdolen et al., 1996).В отличие от вы шеупомянутых данных, мы не получили какихлибо признаков наличия участков βслоев в GFD в получен ных нами образцах uPA как в свободном состоянии, так и в комплексе с uPAR. GFD Представляется доста точно гибким и неструктурированным доменом, способным, тем не менее, к высокоспецифичному взаимо действию с uPAR как in vitro, так и в экспериментах с клеточными культурами. Для оценки вторичной струк туры GFD урокиназы мы использовали круговой дихроизм, изменение флюоресценции триптофана при температурной денатурации белка и гетероядерную ЯМРспектроскопию ATF, меченного 15N и 13C, в сво бодном состоянии и в комплексе с uPAR. КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: урокиназа, урокиназный рецептор, ЯМР, Ωпетля.
Добавил в систему: Белоглазова Ирина Борисовна

	ИСТИНА	Войти в систему Регистрация
	ИСТИНА ЦЭМИ РАН
	Главная Поиск Статистика О проекте Помощь

ИСТИНА

ИСТИНА ЦЭМИ РАН

Структурные исследования рекомбинантного ростового домена урокиназыстатья

Прикрепленные файлы