|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Опыт создания коллекции клеточных культур немелкоклеточного рака легкого в ФГБУ "НМИЦ онкологии" Минздрава Россиистатья
- Авторы: Межевова И.В., Ситковская А.О., Филиппова С.Ю., Шамова Т.В., Тимофеева С.В., Гненная Н.В., Новикова И.А., Харагезов Д.А., Милакин А.Г., Лейман И.А., Статешный О.Н., Росторгуев Э.Е., Атмачиди Д.П., Лаптева Т.О., Волошин М.В., Еремин К.С., Сухарь И.А.
- Журнал: Южно-Российский онкологический журнал
- Том: 3
- Номер: 4
- Год издания: 2022
- Издательство: Автономная некоммерческая организация "Перспективы онкологии"
- Местоположение издательства: Ростов-на-Дону
- Первая страница: 14
- Последняя страница: 25
- DOI: 10.37748/2686-9039-2022-3-4-2
- Аннотация: Цель исследования. Тестирование новых химиотерапевтических агентов в трансляционной и биомедицине нуждается в исследованиях на иммортализованных клеточных линиях. Однако такие модели не всегда обладают биологическими свойствами опухоли in situ , в отличие от первичных культур клеток. Первичные культуры клеток рака легкого обладают близкими или идентичными опухолевым клеткам in vivo биологическими, гистологическими и молекулярными характеристиками. Получение коллекций первичных клеточных линий рака легкого является важной задачей в создании различных моделей для доклинических исследований. Материалы и методы. В работе использовали послеоперационные образцы опухоли, полученные от 25 пациентов с впервые выявленным раком лёгкого без предварительного лечения. Для получения первичных культур использовали следующие методы: ферментативной диссоциации в растворе Хэнкса с добавлением 300 ед./мл коллагеназы I (Thermo Fisher Scientific, США), ферментативной диссоциации с использованием набора Brain Tumor Dissotiation Kit (Miltenyi Biotec, Германия) и 150 ед./мл коллагеназы I, а также метод эксплантатов. Для удаления фибробластов использовали следующие методы: применение системы FibrOuttm (CHI Scientific, США), магнитная сепарация фибробластов с использованием Anti-Fibroblast MicroBeads (Miltenyi Biotec, Германия) и метод холодной трипсинизации. Результаты. Получено 15 первичных клеточных культур рака легкого, прошедших нулевой пассаж. В данной работе наиболее эффективным оказался метод ферментативной диссоциации. Инкубирование образцов опухоли легкого с коллагеназой в течение 1 ч. сохраняет жизнеспособность и адгезивную способность клеток. Метод эксплантатов не показал своей эффективности в целях долгосрочного культивирования, отсутствовала миграция клеток опухоли на пластик. Магнитная сепарация, как метод удаления стромальных компонентов фибробластов, показала наибольшую эффективность, сохраняя жизнеспособность клеток опухоли. Заключение. Полученные первичные клеточные культуры рака легкого могут быть использованы для многих задач экспериментальной онкологии: исследования биологических особенностей рака легкого, разработки доклинических моделей исследования новых химиотерапевтических препаратов.
- Добавил в систему: Филиппова Светлана Юрьевна