|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
МОЛЕКУЛЯРНО-КЛЕТОЧНЫЕ АСПЕКТЫ ВОЗДЕЙСТВИЯ ВТОРИЧНЫХМЕТАБОЛИТОВ БАРБАРИСА ОБЫКНОВЕННОГО И БЕЛОКОПЫТНИКАГИБРИДНОГО НА КЛЕТОЧНУЮ ЛИНИЮ HELAстатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК- Авторы: Златник Е.Ю., Енин Я.С., Буров О.Н., Бондаренко Е.С., Сагакянц А.Б., Кутилин Д.С., Дзигунова Ю.В., Ишонина О.Г., Шалашная Е.В., Ушакова Н.Д.
- Журнал: Исследования и практика в медицине
- Том: 10
- Номер: 4
- Год издания: 2023
- Первая страница: 31
- Последняя страница: 47
- Аннотация: Цель исследования. Выделить и верифицировать чистые фракции вторичных метаболитов растений, содержащихся в B. vulgaris(L.) и P. hibridus (L.), а также провести модельный эксперимент и молекулярно-генетическоеисследование для оценки их цито-токсического действия в условиях in vitro на клеточной линии HeLa.Материалы и методы. Выделение и верификация всех использованных в эксперименте соединений проводили методами коло-ночной хроматографии и ядерно-магнитногорезонанса на кафедре природных соединений химического факультета Южногофедерального университета. Дальнейший эксперимент выполнен с использованием культуральных и молекулярных методовна клеточной линии HeLa в трех повторах для каждого исследуемого соединения, после инкубации с которыми проводили учетколичества мертвых клеток на автоматическом счетчике NanoEnTek JuliFl, а также измерение количества клеток в состоянииапоптоза методом проточной цитофлюориметрии на анализаторе BD FACSCanto II. Оценку уровня копийности и экспрессиигенов, ответственных за апоптоз, выполняли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени (RT-PCR). Всегоисследовали 3 вещества, по 2 концентрации (4 и 12 мкг/мл) и 2 экспозиции (24 и 72 часа) каждого из них.Результаты. На первом этапе исследования были выделены и верифицированы алкалоид берберин, экстрагированный изкорней B. vulgaris (L.), а также 2,4‑dihydroxy‑2,5‑dimethylfuran‑3(2H)-one и 2,2,8‑trimethyldecahydroazulene‑5,6‑dicarbaldehyde изP. hibridus (L.). На следующем этапе исследования было обнаружено, что клеточная гибель была максимальной под действиемберберина при экспозиции 72 часа. Однако оценка показателей копийности и экспрессии генов CASP8, CASP9, CASP3, BAX, BCL2,TP53 и MDM2 методом RT-PCR выявила наличие инициации апоптоза в опухолевых клетках на молекулярном уровне под дей-ствием всех исследованных соединений: как берберина, так и производных фурана и азулена, полученных из P. hibridus (L.).Заключение. Все использованные в эксперименте соединения показали цитотоксическое действие на клеточную линию HeLa.Алкалоид берберин проявил наиболее выраженное цитотоксическое действие на линию HeLa зарегистрированное всеми исполь-зуемыми в исследовании методами. Терпеноиды 4‑dihydroxy‑2,5‑dimethylfuran‑3(2H)-one и 2,2,8‑trimethyldecahydroazulene‑5,6‑dicarbaldehyde при воздействии на линию HeLa вызвали увеличение показателей копийности и экспрессии локусов CASP9, CASP3которые являются однимм из основных активаторов апоптоза. Они же оказали влияние на экспрессию локусов TP53 и MDM2.
- Добавил в систему: Енин Ярослав Сергеевич