Аннотация:Ранее получены высокоиммуногенные вирусоподобные частицы (VLP), содержащие белки оболочки (Env) ВИЧ-1, которые обладали способностью преодолевать природную резистентность поверхностных белков ВИЧ-1, связанную с их низким содержанием и труднодоступностью консервативных эпитопов для вируснейтрализующих антител. Разработанная технология ранее применена нами для получения VLP, несущих модифицированные тримеры Env штамма ZM53(T/F) ВИЧ-1. Для продукции VLP использовали рекомбинантные вирусы осповакцины, экспрессирующие Env и Gag-Pol (каркасный белок) ВИЧ-1/SIV, а также ген hr вируса коровьей оспы ‒ для преодоления ограничений в репликации вируса осповакцины ‒ в клетках СНО. Экспрессируемый белок Env содержал трансмембранный перекрывающий домен (TMS) вируса опухоли молочной железы мышей (MMTV), увеличивающий включение тримеров Env в VLP, и цитоплазматический домен (СТ) с GCN4-последовательностью, влияющей на конформацию поверхностной субъединицы (SU). Для изучения состава гликанового паттерна Env и его влияния на эффективность формирования VLP использовали мутантную клеточную линия CHO Lec1, в которой нет фермента N-ацетилглюкозаминилтрансфераза TI (GlcNAc-TI), вовлеченного в процессинг высокоманнозных углеводных цепей. Этот прием позволил модулировать состав гликанов на поверхности VLP, оптимизировать условия их формирования и наметить подходы к преодолению ограниченной иммуногенности ВИЧ-1, связанной с экранированием гликанами эпитопов Env.