|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Регистрация бромирующей активности миелопероксидазы с помощью флуоресцеинастатья
Статья опубликована в журнале из списка RSCI Web of Science
Статья опубликована в журнале из перечня ВАК- Авторы: Григорьева Д.В., Горудко И.В., Реут В.Е., Симакин А.В., Костевич В.А., Горбунов Н.П., Панасенко О.М., Соколов А.В.
- Журнал: Журнал прикладной спектроскопии
- Том: 91
- Номер: 2
- Год издания: 2024
- Издательство: Наука и техника
- Местоположение издательства: Минск
- Первая страница: 234
- Последняя страница: 244
- Аннотация: Исследовано изменение спектрально-люминесцентных свойств флуоресцеина после его взаимодействия с различными активными формами кислорода и галогенов (О2•–, H2O2, HOCl, HOBr, HOSCN, N-хлорамин и N-бромамин таурина), а также в системе миелопероксидаза (МПО)-Н2О2-Cl–/Br–/SCN–. Установлено, что после взаимодействия исключительно с HOBr, а также в системе МПО-Н2О2-Br– флуоресцеин превращается в соединение с максимумом поглощения на 518 нм. Максимум флуоресценции данного соединения регистрируется на длине волны 540 нм при возбуждении на 520 нм, что соответствует характеристикам бромированного флуоресцеина — эозина Y. Подобраны оптимальные условия (фосфатно-солевой буфер (рН 7.4), содержащий 137 мМ NaCl, 5 мкМ флуоресцеина, 15—30 мМ NaBr и 25—50 мкМ Н2О2) для регистрации образования в растворе HOBr, на основании чего предлагается качественный метод определения бромирующей активности МПО in vitro. С использованием разработанного метода исследовано влияние физиологических и искусственно синтезированных ингибиторов, а также скэвенджеров активных форм кислорода и галогенов на бромирующую активность МПО. На основании полученных данных установлено, что флуоресцеин представляет собой перспективное соединение для разработки на его основе флуоресцентного метода регистрации бромирующей активности гемсодержащих пероксидаз млекопитающих.
- Добавил в систему: Панасенко Олег Михайлович