ИСТИНА

Создана новая ГКР-сенсорная поверхность, которая обеспечила усиление сигнала ГКР молекул катехоламинов в 104 – 106 раз, что способствовало высокой чувствительности активного элемента сенсора по отношению к указанным соединениям. Наиболее эффективное увеличение относительно малой площади поперечного сечения КР наблюдалось на наночастицах серебра, полученных пиролизом аэрозоля аммиачного комплекса серебра (размером 1 – 5 мкм) на поверхности покровного стекла. При этом полученные результаты продемонстрировали высокую воспроизводимость ГКР сигналов без возникновения существенных изменений в структуре материала при проведении анализа (отсутствие агрегации, рекристаллизации частиц, химического взаимодействия с окружающей средой, фотодеградации образца и т.д.). Предложенный сенсорный материал оказался стабильным при контакте с воздухом в процессе длительного хранения. Кроме того, было достигнуто высокое соотношение сигнал/шум для усиленного спектра за счет минимизации процессов хемосорбции побочных примесей на развитой поверхности наноструктурированного материала, в том числе, хемосорбции продуктов, интермедиатов и реагентов, используемых при получении наноматериала. Внесение дополнительных распознающих агентов: Cu(II) и 4 аминоантипирина на наноструктурированные металлические покрытия предотвращает процесс окисления катехоламинов, позволяя одновременно экспрессно и мультиплексно определять их на уровне ультрамалых содержаний при совместном присутствии. В спектре ГКР адреналина наблюдалось присутствие колебания CH3-группы при NH (1140 см-1), в спектре же норадреналина - отсутствие колебания гидроксильной группы алифатического фрагмента (740 см-1). Кроме того, для колебаний одного типа различных катехоламинов характерны отличные друг от друга сдвиги, что предоставляет возможность селективного и мультиплексного определения. Совместно с японскими учеными разработаны флуоресцентные сенсорные системы для визуализации и определения нейромедиаторов на основе получения их флуоресцирующих производных с ионами металлов непосредственно в полимерных микропористых коллагеновых гелевых матрицах, которые одновременно являются культуральной средой для роста 3D (объемных)-клеточных структур. В результате выполнения проекта нами предложена новая индикаторная система для флуоресцентной визуализации и определения вышеперечисленных соединений на основе тройного комплекса европий-окситетрациклин-нейромедиатор/метаболит (Eu3+–ОТЦ–катехоламин/метаболит) в коллагеновом геле. Предварительные результаты демонстрируют, что предложенная твердофазная индикаторная система позволяет добиться уникальных пределов обнаружения катехоламинов вплоть до фемтомолярных значений концентраций. Для подтверждения возможности использования разработанной системы для определения катехоламинов и их метаболитов в клеточных структурах была оценена устойчивость таких комплексов. Полученные данные свидетельствуют о том, что устойчивость комплексов Eu3+–ОТЦ– катехоламин/метаболит на 1–2 порядка выше устойчивости комплексов меди с креатинином и аминокислотами, а также на 1–3 порядка выше устойчивости комплексов катехоламинов и их метаболитов с кальцием или лантаном, которые давно успешно используют для определения маркеров нейромедиаторного обмена в биообразцах. Высокая устойчивость полученных нами тройных комплексов позволяет использовать их для определения НМ и их метаболитов в клеточных культурах без учета конкурирующих взаимодействий с матричными компонентами образцов.